關(guān)于“PHP色譜柱”的問題,小編就整理了【2】個(gè)相關(guān)介紹“PHP色譜柱”的解答:
色譜柱的分類與選擇?1.硅膠基質(zhì)
1.1反相色譜柱:反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對較弱的官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合最先被沖出,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
1.2正相色譜:正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強(qiáng)弱的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(MethyleneChloride)等。
1.3離子交換色譜柱:以磺化交聯(lián)強(qiáng)陰/陽離子鍵合硅膠色譜柱,常用規(guī)格:強(qiáng)陰離子色譜柱(SAX),強(qiáng)陽離子交換色譜柱(SCX)
2.聚合物基質(zhì):聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1~14均可使用。相對與硅膠基質(zhì)的C18填料,這類填料具有更強(qiáng)的疏水性;大孔的聚合物填料對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效?,F(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效較低。
色譜柱跑空了怎么辦?如果您的色譜柱跑空了,可能是以下幾個(gè)原因?qū)е碌模?/p>
1. 柱子老化或損壞:如果柱子已經(jīng)使用了很長時(shí)間或者受到了損壞,那么它可能會出現(xiàn)跑空的情況。在這種情況下,您需要更換柱子。
2. 進(jìn)樣量過大:如果您的進(jìn)樣量過大,那么可能會導(dǎo)致柱子跑空。您可以嘗試減少進(jìn)樣量并重新運(yùn)行分析。
3. 樣品揮發(fā)性過強(qiáng):如果樣品揮發(fā)性過強(qiáng),那么可能會導(dǎo)致柱子跑空。您可以嘗試將樣品密封或加熱至較低溫度以減少揮發(fā)性。
4. 柱子未正確安裝:如果柱子未正確安裝,那么可能會導(dǎo)致柱子跑空。在這種情況下,您需要檢查柱子的安裝是否正確,并重新安裝柱子。
5. 流速過快或過慢:如果流速過快或過慢,那么也可能會導(dǎo)致柱子跑空。您可以嘗試調(diào)整流速并重新運(yùn)行分析。
如果您無法確定問題的根本原因,建議聯(lián)系專業(yè)的技術(shù)支持人員進(jìn)行進(jìn)一步的診斷和修復(fù)。
只能說有可能,具體有沒有氣泡得具體看情況。如果柱子進(jìn)了氣泡,一來可能壓力會升高,二來可能壓力會忽上忽下,第三可能會出現(xiàn)詭峰。 跑空了確實(shí)對儀器影響很大,可能堵住單向閥、可能堵住泵,可能堵住柱子,也可能堵住檢測器。
再運(yùn)行的時(shí)候要先排氣,把泵前的液體都排掉,然后觀察壓力,如果有明顯的壓力升高找出具體堵住的地方。哪里不好修哪里。
如果都還穩(wěn)定,為了保險(xiǎn)起見可以用0.3-0.5ml/min的流速,過夜沖洗異丙醇。
異丙醇的粘度很大,如果有氣泡說不定可以帶出來。
到此,以上就是小編對于“PHP色譜柱”的問題就介紹到這了,希望介紹關(guān)于“PHP色譜柱”的【2】點(diǎn)解答對大家有用。